近日,西北農林科技大學動物醫(yī)學院教授華進聯(lián)團隊和云南農業(yè)大學教授魏紅江團隊合作,采用高效培育多基因編輯豬的sgRNA表達方案,利用三頭代孕母豬產下兩頭雙基因編輯仔豬。這是西北地區(qū)首次成功獲得多基因編輯克隆豬,標志著該地區(qū)生豬產業(yè)基因編輯生物育種技術達到世界先進水平。相關成果論文在線發(fā)表于《動物學研究》。
過去幾十年,豬繁殖和呼吸綜合征病毒(PRRSV)給全球養(yǎng)豬業(yè)造成了重大經濟損失。鑒于豬CD163基因所編碼的蛋白是PRRSV感染所必需的受體,敲除CD163基因可以培育出對PRRSV感染具有強抵抗能力的新品系。此外,通過基因編輯敲除豬肌肉抑制因子MSTN基因,獲得的豬后代瘦肉率更高。因此,對豬多個基因同時編輯并最終培育出抗病高產新品種,在未來畜牧生產領域具有廣闊的應用前景。
該研究應用3種策略開展豬的多基因編輯,包括共轉染攜帶不同sgRNA的質粒、轉染單個含有串聯(lián)sgRNA表達盒的質粒,以及轉染含有多順反子sgRNA載體的策略。團隊構建了攜帶3種靶向MSTN和CD163的sgRNA表達裝置的載體系統(tǒng),并量化了其在豬胎兒成纖維細胞中的編輯效率。結果表明,串聯(lián)sgRNA表達盒的策略可以高效實現(xiàn)豬的多基因改良。
團隊將CD163和MSTN基因同時編輯的豬胎兒成纖維細胞進行體細胞核移植試驗,利用三頭代孕母豬最終產下兩頭雙基因編輯仔豬。全基因組測序結果證實,兩頭基因編輯豬均未出現(xiàn)預期之外的基因組改變。
相關領域專家認為,該研究為豬的多基因改良提供了一種經濟高效的技術體系,培育的CD163和MSTN雙基因編輯豬也為后續(xù)培育抗豬繁殖與呼吸障礙綜合征種豬及高瘦肉率種豬提供了優(yōu)秀種質材料。(李曉春 張行勇)
關鍵詞: 西北農林科技大學等培育出多基因編輯克隆豬 生豬產業(yè)基因編輯生物育種技術達到世界先進水平 雙基因編輯豬 經濟高效的技術體系
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